• 產(chǎn)品品牌： REAGEN
• 產(chǎn)品貨號(hào)： RN065FP
• 產(chǎn)品規(guī)格： 50/100T
• 產(chǎn)品適用： 對(duì)樣本中流感病毒H5N1亞型RNA進(jìn)行檢測(cè)，適用于流感病毒H5N1型感染的輔助診斷及流行病學(xué)調(diào)查。
• 產(chǎn)地來源： 深圳
• 保質(zhì)期： 12個(gè)月

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：流感病毒H5N1亞型核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

【包裝規(guī)格】

50人份/盒

【預(yù)期用途】

對(duì)樣本中流感病毒H5N1亞型RNA進(jìn)行檢測(cè)，適用于流感病毒H5N1型感染的輔助診斷及流行病學(xué)調(diào)查。

【檢驗(yàn)原理】

本試劑盒采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）結(jié)合Taqman技術(shù)，對(duì)禽流感病毒H5N1亞型的特異性核酸片段進(jìn)行熒光PCR檢測(cè)。

【主要成分】

【儲(chǔ)存條件及有效期】

試劑置于-30~-15℃避光保存，有效期為12個(gè)月。本產(chǎn)品反復(fù)凍融應(yīng)不超過5次。

【適用儀器】

熒光定量PCR儀：ABI 7500熒光PCR儀.；ABI Quantstudio5 ；Gentier 96R；SLAN-96P全自動(dòng)醫(yī)用PCR分析系統(tǒng)。

【樣本要求】

1. 適用樣本

咽拭子：應(yīng)使用專用采樣拭子，適度拭抹咽后壁和兩側(cè)扁桃體部位；迅速將拭子放入標(biāo)本采集管中，旋緊管蓋并密封，以防干燥。                                      

全血：疑似感染動(dòng)物的靜脈血2mL至EDTA-2Na抗凝管，8000rpm離心2min，取適量上清液于1.5mL滅菌離心管中。

2. 樣本運(yùn)輸和保存

上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃，長(zhǎng)期保存可置-70℃，但不能超過6個(gè)月，標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用2~8℃冰袋運(yùn)輸，嚴(yán)禁反復(fù)凍融。

 【檢驗(yàn)方法】

1. 樣本處理

取待測(cè)樣本200ul，按照核酸提取試劑盒說明書進(jìn)行核酸提取。

2. 試劑配置（在準(zhǔn)備區(qū)進(jìn)行，與擴(kuò)增區(qū)分開，冰上操作）

注：試劑使用前要完全解凍，使用前渦旋混勻，10000 rpm離心5 s，確保試劑完全離心至管底，否則會(huì)出現(xiàn)裝量差異的現(xiàn)象。若有N個(gè)待檢測(cè)樣本，則需配置N+2擴(kuò)增反應(yīng)（待檢樣本數(shù)N+1個(gè)陽(yáng)性質(zhì)控品+1個(gè)陰性質(zhì)控品），按下表要求進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)液的配制，配制完成后充分震蕩混勻，10000 rpm離心5 s。按每管20μL分裝至0.2 ml PCR管中，并做好標(biāo)記，擴(kuò)增反應(yīng)液需現(xiàn)配現(xiàn)用。

3. 加樣（在樣品處理區(qū)進(jìn)行，冰上操作）

按陰性質(zhì)控品、待測(cè)樣品、陽(yáng)性質(zhì)控品的加樣順序，分別取5μL，加入至已分裝擴(kuò)增反應(yīng)液的八聯(lián)管中，反應(yīng)總體系為25μL。蓋緊管蓋，短暫離心后置于熒光定量PCR儀中，并記錄樣本擺放順序。

4. 擴(kuò)增反應(yīng)（在擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行）

選擇FAM通道檢測(cè)H5亞型，選擇HEX通道檢測(cè)N1亞型。按以下擴(kuò)增程序表設(shè)置PCR擴(kuò)增參數(shù)。

 5.質(zhì)量控制

以上要求需在同一次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿足，否則，本次實(shí)驗(yàn)無效，需重新進(jìn)行

6.結(jié)果判讀

反應(yīng)結(jié)束自動(dòng)保存結(jié)果，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié)Baseline 的Start 值、End 值以及Threshold 值（可以根據(jù)實(shí)際情況自行調(diào)整，Start 值可以在3~15、End 值可設(shè)在5~20，調(diào)整陰性對(duì)照的擴(kuò)增曲線平直或低于閾值線），點(diǎn)擊Analysis 自動(dòng)獲得分析結(jié)果，在Report 界面觀看結(jié)果。

試驗(yàn)結(jié)果判斷

【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

1．實(shí)驗(yàn)室環(huán)境污染，試劑污染，樣品交叉污染會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，如陰性對(duì)照檢測(cè)為陽(yáng)性，則需做進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)來確認(rèn)是哪類污染。如為試劑污染，需開封新的試劑盒再次進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；如為樣品交叉污染，應(yīng)重復(fù)實(shí)驗(yàn)；如為實(shí)驗(yàn)室環(huán)境污染，需對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行徹底清潔或更換實(shí)驗(yàn)室再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

2．試劑運(yùn)輸、保存或配制不當(dāng)會(huì)引起試劑檢測(cè)性能下降，出現(xiàn)假陰性結(jié)果。如陽(yáng)性對(duì)照檢測(cè)為陰性，應(yīng)開封新的試劑盒再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

【檢測(cè)方法的局限性】

1. 該試劑盒僅為定性產(chǎn)品，不做定量測(cè)定。

2. 當(dāng)樣本的病毒含量低于最低檢出限時(shí)，可能會(huì)出現(xiàn)假陰性。陰性結(jié)果僅說明提取的核酸濃度低于該試劑盒的檢測(cè)極限，但不能完全排除病毒感染的可能。

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

1.準(zhǔn)確性：企業(yè)陽(yáng)性參考品檢測(cè)結(jié)果全部為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為15/15。

2.最低檢測(cè)限：該試劑盒最低檢測(cè)限為500copies/mL。